技術(shù)文章
Technical articles小鼠破骨細(xì)胞是指在體外培養(yǎng)的小鼠骨髓細(xì)胞經(jīng)過處理和分離后得到的細(xì)胞群。這些細(xì)胞具有去骨鈣化和骨吸收的能力,是研究骨代謝、骨疾病等領(lǐng)域的重要細(xì)胞模型。在破骨細(xì)胞培養(yǎng)過程中,通常會用到M-CSF(巨噬細(xì)胞集落刺激因子)及RANKL(受體活化因子K)等因子來誘導(dǎo)小鼠骨髓細(xì)胞分化成破骨細(xì)胞。破骨細(xì)胞可以產(chǎn)生大量的酸性磷酸酶(ACP)和金屬蛋白酶(MMP),這些酶分解骨基質(zhì),促進(jìn)骨吸收。近年來,越來越多的研究表明,小鼠破骨細(xì)胞的研究應(yīng)用前景廣闊。首先,破骨細(xì)胞可以用來研究骨關(guān)節(jié)疾病的發(fā)...
在化合物早期發(fā)現(xiàn)階段,為了初步評估化合物在體內(nèi)被代謝清除的風(fēng)險,采用化合物與肝S9在體外共孵育一段時間后,通過檢測藥物濃度的變化來反映化合物在livermicrosome中的穩(wěn)定性,即為肝S9代謝穩(wěn)定性測試。作為早期化合物篩選中的重要一環(huán),準(zhǔn)確地認(rèn)識該項測試結(jié)果對于化合物性質(zhì)的判斷十分重要。由于認(rèn)識的不足,對于LMS的結(jié)果極易產(chǎn)生錯誤的理解和判斷,下文將就常見的誤區(qū)逐一介紹,并進(jìn)行相應(yīng)的解釋。誤區(qū):LMS體外固有清除率高的化合物體內(nèi)清除率一定很大很多誤區(qū)的造成是對體外試驗體系...
肝微粒體是體外研究一個化合物的代謝(酶抑制、清除率和代謝鑒定)以及藥物-藥物相互作用的主要工具。通常根據(jù)特定細(xì)胞色素酶的活性水平來選擇微粒體。在化合物早期發(fā)現(xiàn)階段,為了初步評估化合物在體內(nèi)被代謝清除的風(fēng)險,采用化合物與肝微粒體在體外共孵育一段時間后,通過檢測藥物濃度的變化來反映化合物的穩(wěn)定性,即為肝微粒體代謝穩(wěn)定性測試。作為早期化合物篩選中的重要一環(huán),準(zhǔn)確地認(rèn)識該項測試結(jié)果對于化合物性質(zhì)的判斷十分重要。由于認(rèn)識的不足,對于LMS的結(jié)果,非常容易產(chǎn)生錯誤的理解和判斷。很多誤區(qū)的...
小鼠破骨細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)過程中的威脅就是細(xì)胞污染,凡是混入細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中,對細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染。細(xì)胞一旦遭到污染,所有的實驗結(jié)果都會變得毫無意義。因此,及時檢測并鑒定出所培養(yǎng)的細(xì)胞是否被污染至關(guān)重要。細(xì)胞培養(yǎng)實驗室要求保持無菌操作,避免微生物及其他有害因素的影響。細(xì)胞培養(yǎng)室要相對封閉,潔凈無塵,設(shè)有緩沖間。對實驗室進(jìn)行定期清掃、紫外消毒是避免細(xì)胞培養(yǎng)過程中由于實驗室環(huán)境引起細(xì)胞污染的主要措施,此外,實驗室內(nèi)不要放太多雜物,保持實驗室干燥,有利于降低...
在科研實驗中一般用到的現(xiàn)成細(xì)胞系/株,我們只需要進(jìn)行細(xì)胞傳代和保種。然而,這些細(xì)胞系常常由于體外長期培養(yǎng),而丟失原有生物學(xué)特性,對藥物處理的反應(yīng)差距越來越大。小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞直接從機體取出的細(xì)胞或從組織獲得的單個細(xì)胞,并可以在體外進(jìn)行培養(yǎng)。這里的組織主要指:器官、外周血及胚胎等。小鼠骨髓內(nèi)皮祖細(xì)胞離體時間短,更接近于生物體內(nèi)的生活狀態(tài),且生物性狀尚未發(fā)生很大改變。因此在藥物篩選、細(xì)胞移植、類器官培養(yǎng)、腫瘤研究等眾多領(lǐng)域備受歡迎。但組織消化過程中常遇到多種問題,例如消化不*、...
小鼠主動脈內(nèi)皮細(xì)胞采用混合酶消化而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,CK-18免疫熒光鑒定細(xì)胞純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。心肌主動脈是供給心臟血液的動脈。主動脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自正常小鼠心肌主動脈,呈單層扁平分布。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞,由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。細(xì)胞來源于成年小鼠主動脈組織,其是組成主動脈腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞,大多...
大鼠軟骨細(xì)胞分離自正常大鼠軟骨組織,軟骨細(xì)胞主要功能:軟骨是人身體中不會發(fā)生的組織;骨骼在發(fā)育初期大部分是由軟骨構(gòu)成的;軟骨一般起到承重負(fù)荷,減少關(guān)節(jié)間骨骼摩擦等作用。前面我們講述過軟骨細(xì)胞的制備方法,但是在制備過程所使用的試劑有哪些,這你們知道嗎?我相信很多人都是不知道的。下面,欣潤生物就來詳細(xì)講述一二。大鼠軟骨細(xì)胞制備過程中主要的試劑:1、PBS:每袋加ddH2O定容至1000ml,調(diào)pH7.2,高壓滅菌消毒。2、DMEM細(xì)胞生長培養(yǎng)液:臨用前根據(jù)需要加10%胎牛血清,1...
小鼠破骨細(xì)胞是骨組織成分的一種,行使骨吸收的功能。破骨細(xì)胞與成骨細(xì)胞在功能上相對應(yīng)。二者協(xié)同,在骨骼的發(fā)育和形成過程中發(fā)揮重要作用。高表達(dá)的抗酒石酸酸性磷酸酶和組織蛋白酶K是破骨細(xì)胞主要標(biāo)志。來源:破骨細(xì)胞是由骨髓中的髓系祖細(xì)胞分化而成的單核巨噬細(xì)胞相互融合,所形成的多核巨細(xì)胞。早期未成熟的增殖性單核吞噬細(xì)胞被稱為破骨細(xì)胞前體,在化學(xué)因子的作用下進(jìn)入血液循環(huán),再在基底多細(xì)胞單位所釋放的信號因子的作用下進(jìn)入骨結(jié)構(gòu)腔體,在各種化學(xué)因子、轉(zhuǎn)錄因子、細(xì)胞因子等信號因子的刺激下融合為多...